Leishmaniasis tegumentaria y flebótomos en la localidad de Colonia Santa Rosa del norte de Argentina / Tegumentary leishmaniasis and sandflies in Colonia Santa Rosa locality in northern Argentina

Resumen La leishmaniasis tegumentaria (LT) es causada por parásitos del género Leishmania y transmitida por especies de flebótomos, insectos pertenecientes al orden Diptera, familia Psychodidae. El objetivo de este trabajo fue analizar la presencia de casos de LT y su variación temporal entre 1985 y 2019, las formas clínicas, la ubicación de las lesiones en los pacientes y la presencia de flebótomos en la localidad de Colonia Santa Rosa, del norte de Argentina. Los pacientes se diagnosticaron mediante frotis e intradermorreacción de Montenegro. Se colocaron trampas CDC en 14 sitios en el horario de 19 a 7. Se diagnosticaron 120 casos de LT y la prevalencia global fue del 0,75% (^16.000 habitantes). Los pacientes presentaron formas cutáneas simples y múltiples (88,79%) y mucocutáneas (10,83%). Las lesiones cutáneas fueron más frecuentes en extremidades inferiores. Del total de flebótomos, Nyssomyia neivai fue la especie predominante (95%), y, en menor proporción, estuvieron presentes Migonemyia migonei (1,9%), complejo cortelezzii (1,3%) y Evandromyia sallesi (0,09%). La persistente ocurrencia de casos y la presencia de flebótomos en la citada localidad nos sugiere la transmisión endémica en la zona. Esto senala la necesidad de planificar medidas preventivas y de control de la LT en el norte de Argentina.

Abstract Tegumentary leishmaniasis (TL) is caused by parasites of the genus Leishmania and transmitted by the sandfly species, insects belonging to the order Diptera, family Psychodidae. Historically, the most endemic area of TL in Argentina has been the northern region. The aim of this work was to analyze the presence and temporal variation of TL cases reported between 1985 and 2019 in Colonia Santa Rosa locality, northern Argentina. Furthermore, its clinical forms were characterized and sandflies were captured. Patients were diagnosed by smear and the Montenegro skin test. For sampling, CDC light traps were placed at 14 sites from 7pm to 7am. The correlation between vegetation cover and sandfly abundance was also studied. One hundred and twenty TL cases were diagnosed and the overall prevalence was 0.75% (M6 000 inhabitants). Patients presented simple and multiple cutaneous leishmaniasis (88.79%) and the mucocutaneous form (10.83%). Skin lesions were more frequent on the lower extremities (46.73%). Of the total number of sandflies, Nyssomyia neivai (95%) was the predominant species followed by Migonemyia migonei (1.9%), cortelezzii complex (1.3%) and Evandromyia sallesi (0.09%). The persistent occurrence of cases and the presence of sandflies in the locality suggest the existence of endemic transmission in the area. This highlights the need to design prevention and control measures for TL in northern Argentina.

Abundancia y diversidad de vectores (Diptera: Psychodidae) en área de transmisión antigua de Leishmaniasis Cutánea en el nuevo mundo después de la construcción del gasoducto Bolivia-Brasil / Abundance and diversity of vectors (Diptera: Psychodidae) in an old transmission area of cutaneous leishmaniasis in the new world after Bolivia-Brazil gas pipeline construction

The objective of this study was to determine the abundance and diversity of the species and their presumed vectorial role in the transmission of Cutaneous Leishmaniasis (CL). Research on sand flies (Diptera: Psychodidae) was carried out in two municipalities in the Ribeira River Valley in the State of Paraná, southern Brazil. One, Adrianópolis, is an endemic area of CL and the other is a recent outbreak area (Cerro Azul). A total of 432 specimens were collected from residential, peri-domestic and wild environments. According to the data obtained, for each ecotope studied, the statistical analysis has shown that two lines of the Lutzomyia intermedia population coexist and that the quantity of specimens from L. intermedia s.l. is significantly different from L. intermedia s.s. in all environments (χ2=9.943; DF=2; p=0.07). The prevalence of L. intermedia (93.28%) in the ecotopes studied suggests that it is the main vector of leishmaniasis. The succession of vector species and their involvement in the epidemiological cycle of L. braziliensis is discussed in this article(AU)

El objetivo de este trabajo fue determinar la abundancia y diversidad de las especies y su supuesto papel vectorial en la transmisión de Leishmaniasis Cutánea (LC). La investigación sobre flebótomos (Diptera: Psychodidae) se llevó a cabo en dos municipios en el Valle del Río Ribeira en el Estado de Paraná, sur de Brasil. Las regiones estudiadas fueron Adrianópolis, área endémica de LC, y Cerro Azul, que se reporta como zona de brote reciente. Se recolectaron un total de 432 especímenes de ambientes residenciales, peri-domésticos y silvestres. El análisis estadístico realizado, a partir de los datos obtenidos para cada ecotopo estudiado, mostró que coexistían dos linajes de la población de Lutzomyia intermedia y que la cantidad de especímenes de L. intermedia s.l. fue significativamente diferente de L. intermedia s.s. en todos los entornos (χ2=9,943; GL=2; p=0,07). La prevalencia de L. intermedia (93,28%) en los ecotopos estudiados sugiere que es el principal vector de la leishmaniasis. La sucesión de especies de vectores y su participación en el ciclo epidemiológico de L. braziliensis se discute en este artículo(AU)

A probable hybrid female Psychodopygus sp. (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) specimen from Amazonas State, Brazil / Un híbrido probable en una hembra Psychodopygus sp. (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) en el estado de Amazonas, Brasil

Phlebotomine sand flies are vectors of several important etiological agents. Sand fly cibaria and genitalia exhibit morphological characters that are essential for species identification. A morphologically anomalous female sand fly of the subgenus Psychodopygus Mangabeira was found in a faunistic survey of a forested area near Manaus, Amazonas State, Brazil. This specimen possesses two pairs of spermathecae and a cibarium with supernumerary rows of teeth. Most morphological anomalies in sand flies occur in the number and arrangement of spines in structures associated with the male genitalia. In females, the number of cibarial teeth is the most common form of anomaly. The specimen described here constitutes a rare anomalous record.

Los flebótomos son importantes vectores de varios agentes etiológicos. En flebótomos, los caracteres morfológicos del cibario y la genitália, son esenciales para la correcta identificación de las especies. Una hembra morfológicamente anómala del subgénero Psychodopygus Mangabeira, fue encontrada en un levantamiento faunístico en un área de bosque cerca de Manaus, estado de Amazonas, Brasil. Este espécime tiene dos pares de espermatecas y un cibario como hileras de dientes supranumerários. La mayoria de las anomalías morfológicas en los flebótomos ocurre en el número y disposición de las espinas en las estruturas de la genitália masculina. En las hembras, el número de dientes del cibario es la forma mas común de anomalía. El espécimen aqui descrito constituye un raro registro de anomalía.

Atração de vetores de leishmaniose tegumentar americana por compostos orgânicos voláteis presentes na pele humana / Attraction of American tegumentary leishmaniasis vectors by volatile organic compounds present on human skin

INTRODUÇÃO. A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é a forma de leishmaniose com maior incidência em humanos, e no Brasil a maioria dos casos está concentrada nas regiões Norte e Nordeste. O protozoário Leishmania braziliensis é considerado o principal agente etiológico com ocorrência no país e tem como principais vetores os flebotomíneos Lutzomyia (Nyssomyia) intermedia e Lutzomyia (Nyssomyia) whitmani. Sabe-se que, de modo geral, o olfato é o principal sentido de orientação dos insetos e, assim, foi assumido neste trabalho que esses vetores são atraídos por compostos orgânicos voláteis (COVs) presentes nos odores da pele humana. OBJETIVO. O objetivo geral do projeto foi identificar os COVs presentes na pele humana e avaliar os seus efeitos na atração de vetores de LTA, com a finalidade de desenvolver e aprimorar alternativas para o controle dos mesmos, de modo que estas possam ser baseadas em COVs que mimetizem os odores da pele humana e, portanto, sejam efetivas na captura de flebotomíneos antropofílicos...

INTRODUCTION. American Tegumentary Leishmaniasis (ATL) is the most frequent form of leishmaniasis among humans. In Brazil most of the cases occurs in the North and in the Northeast of the country. Leishmania braziliensis is the main ethilogic agent and its most common vectors are the phlebotomine sand flies Lutzomyia (Nyssomyia) intermedia and Lutzomyia (Nyssomyia) whitmani. It is known that the olfact is the best developed sense of orientation among insects and thus it was assumed that these vectors are attracted by volatile organic compounds (VOCs) from human skin odors. AIM. The aim of this project was to identify the VOCs from human skin and evaluate their effect on the attraction of ATL vectors, aiming to develop and enhance alternatives of its control, in a way that it can be based on VOCs that mimic human skin odors, which can be effective for anthropophilic phlebotomine capture...

Papel da saliva de flebotomos como marcador de exposição e seu efeito na proteção contra Leishmania braziliensis / Role of saliva from sandflies as an exposure marker and its effect on protection against Leishmania braziliensis

A Leishmaniose Tegumentar (LT) é uma importante patologia causada pelo protozoário Leishmania braziliensis, o principal agente etiológico nas Américas. Esse parasita é transmitido aos hospedeiros através durante a alimentação sanguínea do vetor. Comumente encontrados em área endêmica de LT, os flebótomos Lutzomyia intermedia e Lutzomyia whitmani, foram incriminados como vetores da L. braziliensis. Apesar dos amplos estudos acerca da saliva dos vetores e do papel dos flebótomos na transmissão, muito pouco se sabe sobre o envolvimento de L. whitmani na LT. OBJETIVO. Este trabalho visou avaliar o papel de L. whitmani em etapas críticas da transmissão da L. braziliensis, como a avaliação do vetor na área endêmica, a exposição de animais no peridomicílio humano ao flebótomo e o papel da saliva do vetor no estabelecimento da L. braziliensis em infecção experimental murina. MATERIAIS E MÉTODOS. Para a obtenção dos dados, foram realizados testes sorológicos como ELISA e Western blot no monitoramento das galinhas da área endêmica e nos camundongos mantidos em laboratório. Também foram realizadas coletas e identificação dos flebótomos da área endêmica e ensaios de estimulação celular para análise da resposta celular dos camundongos. RESULTADOS. Os resultados mostraram que galinhas no peridomicílio humano produziram anticorpos anti-saliva de L. whitmani, apresentando reconhecimento específico à saliva desta espécie. Também foi observado que a imunização de camundongos com saliva de L. whitmani é capaz de induzir proteção contra a infecção por L. braziliensis em camundongos imunizados. CONCLUSÃO. Estudos envolvendo a participação de importantes vetores em área endêmica são fundamentais para o entendimento da dinâmica da cadeia epidemiológica e futuros estudos envolvendo o desenvolvimento de vacinas eficazes contra a doença.

INTRODUÇÃO. A Leishmaniose Tegumentar (LT) é uma importante patologia causada pelo protozoário Leishmania braziliensis, o principal agente etiológico nas Américas. Esse parasita é transmitido aos hospedeiros através durante a alimentação sanguínea do vetor. Comumente encontrados em área endêmica de LT, os flebótomos Lutzomyia intermedia e Lutzomyia whitmani, foram incriminados como vetores da L. braziliensis. Apesar dos amplos estudos acerca da saliva dos vetores e do papel dos flebótomos na transmissão, muito pouco se sabe sobre o envolvimento de L. whitmani na LT. OBJETIVO. Este trabalho visou avaliar o papel de L. whitmani em etapas críticas da transmissão da L. braziliensis, como a avaliação do vetor na área endêmica, a exposição de animais no peridomicílio humano ao flebótomo e o papel da saliva do vetor no estabelecimento da L. braziliensis em infecção experimental murina. MATERIAIS E MÉTODOS. Para a obtenção dos dados, foram realizados testes sorológicos como ELISA e Western blot no monitoramento das galinhas da área endêmica e nos camundongos mantidos em laboratório. Também foram realizadas coletas e identificação dos flebótomos da área endêmica e ensaios de estimulação celular para análise da resposta celular dos camundongos. RESULTADOS. Os resultados mostraram que galinhas no peridomicílio humano produziram anticorpos anti-saliva de L. whitmani, apresentando reconhecimento específico à saliva desta espécie. Também foi observado que a imunização de camundongos com saliva de L. whitmani é capaz de induzir proteção contra a infecção por L. braziliensis em camundongos imunizados. CONCLUSÃO. Estudos envolvendo a participação de importantes vetores em área endêmica são fundamentais para o entendimento da dinâmica da cadeia epidemiológica e futuros estudos envolvendo o desenvolvimento de vacinas eficazes contra a doença.

Metaciclogénesis y desarrollo de Leishmania (Leishmania) amazonensis (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) en Lutzomyia ovallesi (Diptera: Psychodidae) / Metacyclogenesis and development of Leishmania (Leishmania) amazonensis (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) in Lutzomyia ovallesi (Diptera: Psychodidae)

La interacción Leishmania-vector es un proceso complejo y multifactorial. En los últimos años se han logrado avances importantes en la relación Leishmania-vector, pero aún se desconocen algunos aspectos. Este trabajo estudia la interacción de Leishmania (Leishmania) amazonensis (Kinetoplastida: Trypanosomadidae) en Lutzomyia ovallesi (Diptera: Psychodidae). Hembras de L. ovallesi fueron infectadas artificialmente y se determinó el patrón de desarrollo, densidad parasitaria, secuencia de morfotipos de promastigotes en las regiones del intestino, efecto de la realimentación, y el patrón de carbohidratos de la superficie de las leptomonas usando lectinas fluorescentes. Los resultados mostraron desarrollo suprapilórico de L. (L.) amazonensis. La densidad parasitaria mostró dos ciclos de división separados en tiempo y espacio, se observaron morfotipos caracterizados como paramastigotes en división. La realimentación no alteró la migración de los morfotipos y la mayor proporción de leptomonas en el intestino medio torácico sugiere migración natural que pudiera ser modulada por el gradiente de carbohidratos en el intestino del flebótomo y por la exposición de saliva. Las leptomonas exhibieron diferentes patrones de unión de glicoconjugados, que sugieren presencia de distintos residuos de carbohidratos en la superficie celular del parásito y/o flagelo, que pueden tener funciones importantes en la interacción y estabilidad de los parásitos en el lumen del intestino y su migración a las diferentes regiones del mismo. Se aportan diferentes aspectos del desarrollo de L. (L.) amazonensis en L. ovallesi importantes para entender su potencial vectorial.

Leishmania-vector interaction is a complex and multifactorial process. During the last few years important advances in the Leishmania-vector interaction have been reached but there still some unknown aspects. This work studies the Leishmania (Leishmania) amazonensis (Kinetoplastide: Trypanosomatidae) interaction in Lutzomia ovallesi (Diptera: Psychodidae). L. ovallesi females were artificially infected and the development pattern, parasite density, and promastigote morphotype sequence in the intestinal regions were determined, as well as the effect of re-feeding, and the carbohydrate pattern of the leptomonad surface using fluorescent lectins. The results showed suprapiloric development of L. (L.)amazonensis. Parasite density showed two division cycles separated in time and space, morphotypes characterized as dividing paramastigotes were observed. Re-feeding did not alter the migration of morphotypes and the greater proportion of leptomonads in the middle intestine suggests a natural migration which could be modulated by the carbohydrate gradient in the phlebotom intestine and by exposure to saliva. Leptomonads exhibited different glyconjugate union patterns which suggest the presence of various carbohydrate residues in the cell surface of the parasite and/or flagellum, which can have important functions in the interaction and stability of the parasites in the intestinal lumen and their migration to the different intestinal regions. Several aspects of L. (L.)amazonensis development in L. ovallesi important for understanding its vectorial potency are discussed.

Actividad repelente de aceites esenciales contra las picaduras de Lutzomyia migonei (Diptera: Psychodidae)

Repellent activity of plant essential oils against bites of Lutzomyia migonei (Diptera: Psychodidae). Natural repellents from plant extracts have demonstrated good efficacy against bites of some insect species. The present study evaluated the repellent effect of essential oils extracted from 8 plants species against bites of Lutzomyia migonei, the Leishmania vector. The essential oils were extracted by steam destillation in Clevenger chamber, from the following plants: Hyptis suaveolens, Pimenta racemosa, Piper marginatum, Monticalia imbricatifolia, Pseudognaphalium caeruleocanum, Espeletia shultzii, Plecthranthus amboinicus and Cinnamomun zeylanicum. Repellency tests were performed under laboratory conditions by the human hand method in cage assays, using female colonies of L. migonei. The more effective oils were tested at variable concentrations on different volunteers. The protection percentage and time were calculated. The results showed what oils of P. caeruleocanum and C. zeylanicum were the most effective. Although P. amboinicus oil also had repellent effect showed an irritant effect. The oils P. marginatum, H. suaveolens and P. racemosa showed no repellent effect, while the rest of oil extracts showed significant repellency in variable degrees. P. caeruleocanum and C. zeylanicum oils provided the 95% protection against bites of L. migonei for 3h. The P. caeruleocanum oil showed the greatest protection time, with a mean over 4h and 3h at concentrations of 50% and 10% respectively. The results suggest that the P. caeruleocanum oil could represent a potential natural repellent against Leishmania vectors. Rev. Biol. Trop. 58 (4): 1549-1560. Epub 2010 December 01.

Los repelentes naturales de extractos de plantas han mostrado eficacia contra diferentes especies de insectos. El presente estudio evaluó la acción repelente de aceites esenciales extraídos de ocho especies de plantas contra las picaduras de Lutzomyia migonei, vector de Leishmania. Los aceites esenciales se obtuvieron por hidrodestilación, utilizando una trampa de Clevenger, a partir de Hyptis suaveolens, Pimenta racemosa, Piper marginatum, Monticalia imbricatifolia, Pseudognaphalium caeruleocanum, Espeletia shultzii, Plectranthus amboinicus y Cinnamomun zeylanicum. Los ensayos de repelencia se realizaron sobre humanos en condiciones de laboratorio, frente a hembras de L. migonei provenientes de colonia, utilizando el método de la mano en la jaula. Los aceites con efecto repelente también se ensayaron con distintos voluntarios y concentraciones. Se determinó el porcentaje de protección y el tiempo de protección. Los resultados revelaron que el aceite de P. caeruleocanum y C. zeylanicum fueron los más efectivos. El aceite de P. amboinicus presentó efecto de repelencia satisfactorio, sin embargo, ocasionó picazón y toxicidad en la piel. Los aceites de P. marginatum, H. suaveolens y P. racemosa no evidenciaron efecto repelente; el resto de los aceites presentaron repelencia significativa en grado variable. Los aceites de P. caeruleocanum y C. zeylanicum mostraron un 95% de protección de 3h contra las picaduras de L. migonei. El aceite de P. caeruleocanum presentó el mayor tiempo de protección, de más de 4h y de 2h en concentraciones de 50% y 10%, respectivamente. Los resultados sugieren que el aceite P. caeruleocanum podría ser un potencial candidato como repelente natural contra la picadura de dípteros posibles transmisores de Leishmania.

HALLAZGOS NUEVOS EN LA DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA DE WarileyaY Brumptomyia(DIPTERA: PSYCHODIDAE) EN EL SUROESTE DE COLOMBIA / New Geographic Records of Warileyaand Brumptomyia (Diptera: Psychodidae) in South Western Colombia

Se informa la presencia de Warileya nigrossaculus y Warileya rotundipennis en nuevas localidades de Buenaventura, y se registra por primera vez Brumptomyia beaupertuyi para el occidente de Colombia, en una zona rural de Tuluá, Valle del Cauca, Colombia.

The presence of Warileya nigrossaculus and Warileya rotundipennis is informed in new localities of Buenaventura. Brumptomyia beaupertuyi is registered for the first time in western Colombia, in a rural area of Tuluá, Valle del Cauca, Colombia.

Registros de lutzomyia (Diptera: Psychodidae) en nuevas localidades de Colombia / Records of lutzomyia (Diptera: Psychodidae) in new localities of Colombia

Introducción: Los insectos del género Lutzomyia son vectores biológicos de bacterias, protozoarios y virus que atacan tanto a los seres humanos como a los animales. Tienen importancia sobre todo por cuanto las hembras, que son hematófagas, transmiten las diversas formas de leishmaniasis. En Colombia diferentes estudios han comunicado la distribución geográfica de estos dípteros. Con el presente trabajo se informan las especies en distintas localidades y se incluyen varios lugares sin registros conocidos antes. Materiales y métodos: Los ejemplares de este estudio se capturaron cuando pretendían picar a los colectores y con trampas donde el cebo era la luz o un animal. Varios especimenes se atraparon en sitios de reposo. A los flebótomos así obtenidos se les trató con diversos sistemas para poder disecarlos y montarlos entre lámina y laminilla a fin de hacer las identificaciones hasta especie. Resultados: A partir del estudio de 716 representantes, 124 machos y 592 hembras del género Lutzomyia, en 46 sitios de 29 municipios, 11 departamentos, fue posible identificar 33 especies. Discusión: Se amplía en forma considerable la distribución geográfica de los miembros del género Lutzomyia en varios sitios de Colombia. Se menciona la importancia de algunas especies antropofílicas en su responsabilidad como transmisores de enfermedades, sobre todo de las distintas leishmaniasis y se destaca la necesidad de estudios sistemáticos y taxonómicos a fin de fijar sus papeles en la diseminación de agentes patógenos que afectan a los seres humanos.

Introduction: Phlebotomine sand flies are biological vectors of bacteria, protozoa and viruses attacking both human beings and animals. Sand flies are important since females have haematophagous habits and transmit various types of leishmaniases. In Colombia different studies have given the geographic distribution of these insects. This paper reports the finding of species in several localities and includes some places with no previous records. Material and methods: Specimens were captured while attempting to bite on collectors and with traps (light bait and animal bait). Other specimens were trapped in resting places. Sand flies were processed with different techniques regularly used for dissecting and mounting them for species identification. Results: From the study of 716 specimens, 124 males and 592 females, of the genus Lutzomyia in 46 places from 29 municipalities, in 11 departments (= states, provinces) it was possible to identify 33 species. Discussion: The geographic distribution of the genus Lutzomyia is being greatly extended to new Colombian localities. The importance of some anthropophilic species as vectors of diseases, mainly leishmaniases is discussed. The necessity of systematic and taxonomic studies to know the role of these insects in the transmission of pathologies affecting humans is emphasized.

Considerations on the effect of anti-sandfly antibodies on biological parameters of Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae)

The immunization of vertebrate hosts with vector components may be an alternative for the control of diseases transmitted by insects. In the present study we evaluated the effects of anti-sandfly antibodies on some of the biological parameters of female Lutzomyia longipalpis, a vector of visceral leishmaniasis. Rabbits were immunized with extracts of gut from blood-fed (GB) or sugar-fed (GS) females, carcass of sugar-fed (CS) or blood-fed (CB) females, and with repeated sandfly bites (BITE). Immune sera showed increased antibody titers compared to pre-immunized animals, and specific bands were detected by Western Blot. An analysis of biological parameters revealed a decline in fecundity in the group of females fed on rabbits immunized with GB and BITE. Longevity and mortality were studied in females with oviposition (parous) and without oviposition (nulliparous). Nulliparous females that fed on rabbits immunized with bites died in the highest percentage. A mortality analysis after egg laying revealed a peak on the fifth day in all the groups, but females fed on rabbit subjected to repeated bites showed a shift towards the third day.

A imunização de hospedeiros vertebrados com componentes derivados de vetores pode se constituir numa estratégia alternativa para o controle de doenças transmitidas por insetos. No presente estudo avaliamos o efeito de anticorpos antiflebótomos sobre alguns parâmetros biológicos de fêmeas de Lutzomyia longipalpis, vetor de leishmaniose visceral. Coelhos foram imunizados com extratos de tubos digestivos de fêmeas alimentadas com açúcar (GS), fêmeas alimentadas com sangue (GB), carcaças de fêmeas alimentadas com açúcar (CS) ou carcaças de fêmeas alimentadas com sangue (CB), e coelho imunizado por repetidas picadas de fêmeas de flebótomos (BITE). Os soros imunes de coelhos apresentaram títulos aumentados quando comparados com os soros pré-imunes, e bandas específicas foram detectadas por meio de Western Blot. A análise dos parâmetros biológicos revelou um decréscimo na fecundidade no grupo de fêmeas alimentadas em coelho imunizado com GB e BITE. A longevidade e a mortalidade foram estudadas em fêmeas com postura (paridas) e fêmeas sem postura (nulíparas). Fêmeas nulíparas que se alimentaram em coelho imunizado por repetidas picadas morreram em maior percentual. A análise da mortalidade, após a postura dos ovos, revelou um pico no quinto dia em todos os grupos, mas em fêmeas que se alimentaram em coelho submetido a repetidas picadas, foi antecipada para o terceiro dia.